Biyolojik izleme için kullanılan indikatör bakteriler Özel Etilen Oksit Tedavisi Bacillus subtilis var. nijer sporu. Yetiştirme sonrasında pozitif kontrolde 24 saat içinde bakteri üremesi görülür; İzleme örneklerinin sürekli kültürlenmesi ve 5 gün boyunca gözlemlenmesi ve hepsinin aseptik olarak üremesi durumunda biyolojik indikatör kültürünün negatif olduğu ve sterilizasyonun nitelikli olduğu raporlanabilir.

Pozitif kontrol grubunun sonucu pozitif, negatif kontrol grubunun kültürü negatif, test grubunun kültürü negatiftir. Sterilizasyonun nitelikli olduğu belirlenir. Pozitif kontrol grubu pozitifse, negatif kontrol grubu kültürde negatifse ve test grubu pozitifse, sterilizasyon niteliksizdir; Aynı zamanda test grubundaki pozitif bakterilerin gösterge bakteri mi yoksa kirlilikten mi kaynaklandığı da tespit edilecektir.

Rutin biyolojik test paketini sterilizatörün sterilize edilmesi en zor kısmına (tüm sterilizasyon paketlerinin ortasına) yerleştirin ve sterilizasyon döngüsünün tamamlanmasından hemen sonra biyolojik test paketini sterilize edilmiş ürünlerden hemen çıkarın. Bağımsız biyolojik indikatör, ürün talimatlarına uygun olarak kültürlenecektir. Spor bakteri tableti kullanılıyorsa, spor bakteri tableti, steril koşullar altında 5ML tripton soya fasulyesi besiyeri ortamı (TSB) içeren steril tüpe aşılanacak ve 48 saat boyunca 36 °C ± °C'de kültürlenecektir. Ön sonuçlar gözlemlenerek steril büyüme tüpünden 7. güne kadar kültür yapılmasına devam edilir. Test sırasında kültür ortamı negatif kontrol olarak kullanılır (kendi kendine yeten biyolojik göstergeler için negatif kontrol gerekli değildir) ve spor hücrelerini içeren kültür ortamı pozitif kontrol olarak kullanılır.